Massive Photonics特约代理经销商

▎前言

BBIN中国官方网站作为德国Massive Photonics特约代理经销商，面向国内实验室提供DNA-PAINT、FAST-PAINT及RESI相关标记试剂盒、成像链与缓冲体系咨询与供货服务，协助科研人员按靶点、荧光通道与通量配置超分辨成像试剂。

▎一、公司介绍

Massive Photonics专注于DNA-PAINT超分辨显微成像用标记试剂与方案设计，业务覆盖二抗替代型单域抗体结合剂、荧光蛋白标签结合剂、直接靶点结合剂、神经影像组合盒、多重成像盒及RESI亚纳米分辨率试剂。产品以短链DNA对接序列与染料标记成像链为基础，配合抗体孵育、洗涤与成像缓冲体系，用于固定细胞、组织切片及玻片样本的单分子定位采集。

品牌技术路线围绕“对接链—成像链"瞬时杂交产生可控闪烁信号展开，提供标准DNA-PAINT序列、FAST快速序列、FAST-FG荧光生成序列、FAST-LB长结合序列等不同动力学选项，并按小鼠IgG、兔IgG、GFP、mEOS、TagFP、ALFA、肌动蛋白、PSD95、Tau、Bassoon、MAP2等靶点组织试剂盒。试剂适用于常见全内反射荧光、HILO及单分子定位显微镜，可与Picasso等开源定位分析流程衔接。

▎二、热门产品介绍

① MASSIVE-sdAB 1-PLEX　单域抗体DNA-PAINT二抗试剂盒

◇ 品名与公开信息  

品名：MASSIVE-sdAB 1-PLEX。该产品提供抗小鼠IgG kappa轻链单域抗体（资料示例克隆1A23）或抗兔IgG单域抗体（资料示例克隆10E10），单域抗体位点特异性偶联单一DNA-PAINT对接位。配套成像链可按Imager 1或Imager 2配置，染料可选Cy3B或ATTO 655；同时提供抗体孵育缓冲、10×洗涤缓冲、成像缓冲。

◇ 产品特点  

单域抗体体积小于常规二抗，连接误差较小，对一抗所标蛋白的空间可达性较好。两个单域抗体可结合一个一抗，形成两个对接位，较常规多标二抗更易控制信号密度。提供PBS、50%甘油、0.05% NaN₃保存体系，单域抗体蛋白浓度5 μM、DNA浓度5 μM，体积100 μL；成像链1 μM、TE缓冲，体积300 μL。

◇ 存储条件  

单域抗体原液：-20℃，PBS、50%甘油、0.05% NaN₃。  

成像链原液：-20℃，1 μM TE（10 mM Tris、1 mM EDTA、pH 8）；可分50 μL分装以减少反复冻融，工作分装可短期4℃、长期-20℃。进一步稀释建议临用现配，低浓度成像链在塑料管中稳定性较差。  

抗体孵育缓冲：2-8℃，30 mL；长期可分装-20℃。  

10×洗涤缓冲：室温，20 mL，使用前按1:10用水稀释。  

成像缓冲：室温，50 mL。

◇ 工作原理  

单域抗体通过DNA对接链将一抗信号转化到固定样本表面。加入染料标记成像链后，成像链与对接链发生短暂杂交与解离，形成单分子水平的可定位闪光。相机连续采集大量闪光坐标，经定位算法重建亚衍射尺度分布图。相较于持续发光染料，瞬时杂交可降低连续光漂白压力，按序列差异实现顺序多重着色。

◇ 使用方法  

1）按目标蛋白与一抗方案完成样本固定、透化及一抗孵育。  

2）用1×洗涤缓冲清洗。  

3）按抗体孵育缓冲稀释单域抗体，资料推荐起始1:100-1:500，具体按靶点可及性与表达量优化。  

4）室温孵育30-60分钟。  

5）1×洗涤缓冲洗三次。  

6）可选加入基准标记物。  

7）用成像缓冲漂洗一次，再加入含成像链的成像混合液。  

8）成像链起始可试用1 nM，按闪烁密度调整；过密则降低浓度，过稀则提高浓度。  

9）采集参数可参考曝光100-150毫秒；561 nm约200 W/cm²、640 nm约300 W/cm²，按TIRF或HILO光路调整；环境温度21-25℃较适宜，采集时长按靶点密度与成像链浓度确定。  

10）成像结束可用1×洗涤缓冲置换并4℃短期保存。

② MASSIVE-sdAB-FAST 1-PLEX　FAST序列快速DNA-PAINT二抗试剂盒

◇ 品名与公开信息  

品名：MASSIVE-sdAB-FAST 1-PLEX。面向小鼠IgG kappa轻链或兔IgG一抗，提供驼源单域抗体偶联FAST序列；序列选项包括FAST、FAST-FG（荧光生成）、FAST-LB（长结合），染料选项包括Cy3B、ATTO 655。产品归属FAST-DNA-PAINT与二抗结合剂类别。

◇ 产品特点  

FAST对接序列相较标准DNA-PAINT序列可缩短采集时间，资料表述为至少减少3倍；同条件下信号背景比较稳定。每个单域抗体位点特异性偶联一个FAST对接位，两个单域抗体可结合一个一抗，形成两个对接位。FAST适用于较快帧率与较高通量筛查；FAST-LB延长结合时间，便于观察高密度或弱信号靶点；FAST-FG在特定杂交状态下提高荧光产出效率，适合降低背景干扰。

◇ 存储条件  

产品页未在该摘要中给出逐组分温区；参照同品牌sdAB与成像链通用做法，单域抗体偶联物按出厂缓冲冷冻保存，成像链按染料与寡核苷酸稳定性冷冻保存，抗体孵育缓冲冷藏、洗涤缓冲室温稀释、成像缓冲室温存放。到货后应核对每批次datasheet所列温区与效期，按分装量使用。

◇ 工作原理  

FAST序列通过优化杂交动力学，使成像链在对接链上更频繁完成结合、解离循环。相机以较短曝光捕获单次闪光，累计坐标后重建定位图。由于每个单域抗体只带一个FAST位，信号数量与对接位数量关系较明确，便于在定量实验中控制标记比。对一抗种属可选小鼠或兔，配合不同激光与染料实现顺序多重。

◇ 使用方法  

1）样本完成一抗染色并洗涤。  

2）按FAST试剂盒提供的抗体孵育缓冲稀释sdAB-FAST结合剂，起始比例可参照同类sdAB资料做1:100-1:500预实验。  

3）室温孵育约30-60分钟。  

4）洗涤去除未结合结合剂。  

5）加入含FAST成像链的成像缓冲；FAST常规序列可试用50-75毫秒曝光思路，FAST-LB可试用100-150毫秒思路，实际按闪烁频率调节成像链浓度。  

6）在21-25℃采集；若使用561 nm通道观察Cy3B、640 nm通道观察ATTO 655，按显微镜TIRF/HILO深度与靶密度设置激光强度。  

7）采集结束后洗涤并按缓冲体系短期保存或进入下一重序列成像。

③ MASSIVE-TAG-Q anti-mEOS　mEOS荧光蛋白标签DNA-PAINT定量试剂盒

◇ 品名与公开信息  

品名：MASSIVE-TAG-Q anti-mEOS。产品归属荧光蛋白与标签成像试剂盒，针对mEOS及其常见衍生荧光蛋白标签，提供单域抗体偶联标准DNA-PAINT对接位，配套成像链与缓冲。同系列另有MASSIVE-TAG-Q anti-GFP、MASSIVE-TAG-Q anti-TagFP、MASSIVE-TAG-Q anti-ALFA；其中Q系列侧重每个结合剂单对接位、便于定量读取。

◇ 产品特点  

单域抗体识别mEOS标签，每个抗体偶联一个DNA-PAINT对接位，标记比例较易解释。试剂盒提供免疫染色与DNA-PAINT成像所需结合剂、成像链、抗体孵育缓冲、洗涤缓冲与成像缓冲，适合稳定转染mEOS融合蛋白的细胞样本。相比直接使用荧光蛋白自发荧光，DNA-PAINT可借助顺序成像链分离多个靶点，减少光谱串色处理难度。

◇ 存储条件  

该类标签试剂盒未在前述摘要中列全逐瓶温区；按同品牌DNA-PAINT常规执行：单域抗体偶联物冷冻保存，成像链冷冻保存并避免反复冻融，抗体孵育缓冲冷藏，10×洗涤缓冲室温、使用时稀释，成像缓冲室温。具体效期、分装体积与甘油含量以当批datasheet为准。

◇ 工作原理  

mEOS标签蛋白由抗mEOS单域抗体识别，单域抗体携带对接链。加入染料标记成像链后，成像链与对接链瞬时杂交产生可定位闪光。因每个结合剂仅一个对接位，定位点数量与标签接近程度较容易建立校准关系，适合做相对定量、聚集分析和亚细胞分布统计。若与FAST版本替换，可进一步缩短采集时间；本标准Q版更偏稳定、可控的定量流程。

◇ 使用方法  

1）培养并固定表达mEOS融合蛋白的样本，必要时做透化。  

2）按说明书用抗体孵育缓冲稀释抗mEOS sdAB-DNA对接偶联物。  

3）室温孵育30-60分钟，使单域抗体结合mEOS标签。  

4）用1×洗涤缓冲充分清洗未结合试剂。  

5）用成像缓冲平衡样本，加入对应染料成像链；标准DNA-PAINT可参考100-150毫秒曝光做预采集，按闪烁密度调成像链浓度。  

6）561 nm观察Cy3B、640 nm观察ATTO 655；激光强度按TIRF/HILO与样本厚度调整。  

7）如需多重，可在完成一重序列采集并洗涤后，换用不同对接/成像序列继续采集。  

8）原始闪烁文件导入定位分析软件，做漂移校正、滤点与重建。

补充可选型：神经影像目录中Massive-AB-FAST anti-Bassoon目录号2050、anti-MAP2目录号2059、anti-Tau目录号2055/MP2057，分别适配突触、树突、微管相关蛋白超分辨多重实验。

▎三、解决实验中哪些问题

1）常规宽场或共聚焦难以区分20纳米以内蛋白间距：DNA-PAINT通过单分子坐标积累，可呈现亚衍射尺度分布，用于点状结构、环型结构、簇状聚集的统计。

2）二抗体积大导致连接误差与空间偏移：单域抗体结合剂尺寸较小，距一抗表位更近，可提高定位与主表位的一致性。

3）多靶点光谱串色复杂：不同DNA序列可在同一激光、同一染料通道下按顺序成像，减少多激光、多 detector 配色限制。

4）FAST采集耗时过长：FAST序列缩短单帧有效曝光与总采集时间，适合筛选批量样本、观察易漂移动物样本或通量较高的定位实验。

5）荧光蛋白自身亮度、光转换与串色不稳定：以标签单域抗体加DNA对接链替代直接荧光读取，可通过外源成像链补充信号并做顺序分离。

6）定量标记比例不清：Q系列每结合剂单对接位，便于建立定位点数、标签数与蛋白拷贝数之间的校准备选关系。

7）神经突触多蛋白共定位繁杂：Bassoon、PSD95、MAP2、Tau、Synaptotagmin等组合可通过不同对接序列分步采集，降低同时多色光路要求。

▎四、购买本品牌产品常见疑问与解答

问：如何确定选MASSIVE-sdAB还是MASSIVE-sdAB-FAST？  

答：若实验以标准定位、定量校准为主，且对总采集时长不敏感，可选择标准sdAB 1-PLEX/2-PLEX；若需缩短采集、提高每日样本通量，或靶点闪烁过短导致定位点不足，可评估FAST 1-PLEX。FAST-FG关注背景控制，FAST-LB关注长结合与弱信号。

问：小鼠和兔一抗能否放在一个盒内？  

答：单PLEX默认按种属单选；同时标小鼠、兔可评估2-PLEX或分别采购对应结合剂。多重种属混用前应确认各一抗表位不竞争、洗涤与孵育顺序兼容。

问：ATTO 655与Cy3B如何选？  

答：ATTO 655常配640 nm线，适合深红通道与多色顺序；Cy3B常配561 nm线，信号响应较快。选择应结合显微镜激光、相机量子效率及与其他染料的光谱安排。

问：DNA-PAINT必须用什么显微镜？  

答：需具备单分子定位能力的荧光系统，常见TIRF或HILO照明，配sCMOS相机与对应激光。并非所有宽场显微镜都直接适用；采购前应提供显微镜型号、激光波长、物镜NA与相机像素尺寸供试剂配色评估。

问：成像链浓度如何起步？  

答：sdAB 1-PLEX资料给起始1 nM作为参考；实际按靶点密度、对接位数量、曝光与激光调整。闪烁过密会增加重叠定位，过稀会延长采集，建议先做单重梯度。

问：缓冲体系能否自配替代？  

答：试剂盒提供抗体孵育、洗涤、成像缓冲是为DNA杂交与单分子闪烁设计；自行替换可能影响离子强度、氧猝灭、pH与背景。若无特殊原因，建议先用原厂缓冲，再做配方比对。

问：样本固定方式有何限制？  

答：DNA-PAINT多用于固定透化样本。醛类固定、冰甲醇固定、细胞爬片、组织切片均可按靶点优化；易丢失表位的蛋白应先做一抗条件筛选，再接入DNA-PAINT结合剂。

问：标签试剂盒与直接一抗试剂盒如何搭配？  

答：内源蛋白可用sdAB/AB二抗盒；外源融合蛋白可用TAG-Q、TAG-X2、TAG-Q-FAST等标签盒。同一细胞若同时做内源与标签，应设计不同对接序列并验证一抗、单域抗体无交叉。

问：效期与冻融会否影响性能？  

答：单域抗体与成像链对反复冻融较敏感。建议按使用频次分装，避免小体积低浓度成像链长期存于未分装原管；到货后记录批号、效期与分装日期。

问：多重6色如何规划？  

答：可采用不同对接序列分组，同染料顺序成像，或不同染料分通道再顺序成像。应预留洗涤与重悬步骤，避免上一重成像链残留造成假定位。

问：RESI与DNA-PAINT有何差别？  

答：RESI在DNA-PAINT基础上通过顺序多重对接与迭代定位进一步提高空间分离能力，适合ALFA、GFP等标签的致密蛋白复合体研究；常规DNA-PAINT更偏通用蛋白分布与多重着色。

问：数据量较大如何处理？  

答：按相机像素、帧数、采集时长估算存储；定位分析可用Picasso等流程做闪光检测、漂移校正与重建。采购试剂时可同步确认实验通量，避免重复采购不同序列版本。

问：进口试剂清关与批号如何管理？  

答：通过BBIN中国官方网站特约代理渠道咨询在售品名、预计货期与批号文件；到货后留存datasheet、COA与效期标签，按实验室试剂台账登记。

问：没有超分辨经验能否上手？  

答：可先以MASSIVE-sdAB 1-PLEX或DNA-PAINT starter相关方案做单靶点练习，掌握洗涤、成像链浓度、曝光与定位参数后，再扩展FAST、多重与RESI。

▎五、适用实验场景

◇ 固定细胞单蛋白超分辨分布  

◇ 双/三靶点DNA-PAINT共定位  

◇ GFP、mEOS、TagFP、ALFA融合蛋白定量定位  

◇ 神经突触Bassoon、PSD95、MAP2、Tau、Synaptotagmin多重组网  

◇ F-actin单分子闪烁成像  

◇ 亚细胞器蛋白簇大小、间距与拷贝数统计  

◇ RESI亚纳米级蛋白复合体顺序解析

▎六、试剂选型简要路径

1）已有小鼠/兔一抗→评估MASSIVE-sdAB或MASSIVE-sdAB-FAST单PLEX/多PLEX。  

2）外源GFP/mEOS/TagFP/ALFA→评估TAG-Q、TAG-X2或TAG-Q-FAST。  

3）直标靶点PSD95、Tau、Bassoon、MAP2、Actin→评估直接靶点/神经影像盒。  

4）多重超过三色→按对接序列分组，同染料顺序或分染料顺序。  

5）追求短采集→FAST；追求长结合稳定→FAST-LB；追求低背景→FAST-FG。  

6）定量为主→Q标准对接；信号放大为主→X2双克隆或AB多标二抗。

关键词：DNA-PAINT试剂盒、FAST-PAINT试剂、超分辨显微成像、单域抗体标记、mEOS标签成像、GFP超分辨定位、多重免疫荧光、神经突触超分辨、Bassoon试剂、MAP2成像盒、Tau蛋白DNA-PAINT、PSD95定位试剂、RESI亚纳米成像、ATTO655成像链、Cy3B对接链、单分子定位缓冲、细胞超分辨染色、组织切片DNA-PAINT

更多产品信息，请联系中国区域代理商：BBIN中国官方网站

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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